噬菌體篩選是一項強大的生物技術，在生物醫學研究領域發揮著重要作用，為新藥研發、疾病診斷和治療等提供了有力的工具。
 

　　1.構建噬菌體文庫：將感興趣的蛋白質或多肽等外源基因片段插入到噬菌體的基因組中，使這些分子能夠展示在噬菌體的表面，形成噬菌體展示庫。例如，把目標抗原相關的抗體成分整合進噬菌體里，構建出噬菌體抗體庫。
 

　　2.選擇性結合：把構建好的噬菌體文庫與特定的配體相接觸。此時，只有那些表面展示的分子能與目標配體發生特異性結合的噬菌體才會被保留下來。這一過程利用了分子間的識別特性，確保只有具備相應功能的噬菌體進入下一步。
 

　　3.富集與擴增：經過初步篩選后，對保留下來的噬菌體進行感染宿主細胞(如大腸桿菌)，使其大量復制和擴增。然后重復“吸附—洗脫—擴增”的循環步驟，經過多輪這樣的操作，逐步提高可以特異性識別靶分子的噬菌體比例，獲得能夠識別靶分子的多肽或者蛋白。
 

　　噬菌體篩選中的注意事項：
 

　　1.試驗材料要求
 

　　-試驗菌純度：必須是純培養物，如遇裂解模式不規則，應將菌株重新分純后再作試驗。
 

　　-平板烘干程度：平板必須烘干適度，烘干不足時滴加噬菌體會相互融合，烘干過度時裂解反應不易出現。
 

　　-菌液濃度適宜：菌液要達到大約10 cfu/mL的濃度，否則陽性裂解率將降低。
 

　　2.操作規范
 

　　-準確滴加與記錄：滴加噬菌體的位置切勿搞錯，記錄結果應與所滴加的噬菌體一致。
 

　　-防止交叉污染：嚴格防止噬菌體交叉污染，一旦發生交叉污染，哪怕只有十萬分之一的量，已足夠使全部結果發生錯亂。
 

　　-保存條件控制：夏秋季天氣炎熱時，診斷噬菌體不可長時間放在室溫中，應待滴加噬菌體時才從冰箱中取出使用，用后立即放回冰箱保存。
 

　　-避免污染失效：噬菌體液易生長細菌，必須嚴格防止污染，已混濁者不可使用。
 

　　-忌用灼熱接種環挑取：切忌用灼熱的接種環挑取噬菌體液，以防效價迅速下降。
 

　　3.篩選過程中的其他要點
 

　　-保持細胞活性與抗原完整性：篩選過程中需保持細胞活性(如使用含Ca/Mg的緩沖液)，避免抗原構象破壞，可通過臺盼藍染色或ATP檢測評估細胞狀態。
 

　　-設置陰性對照：每輪篩選必須包含野生型細胞作為陰性對照，用于排除非特異性結合的噬菌體。
 

　　-保護文庫多樣性：擴增時控制感染復數(MOI < 1)，避免優勢克隆過度擴增導致文庫多樣性丟失。