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基因載體圖譜應該這樣閱讀！

基因載體是基因工程的核心，也是基因治療中強有力的生物工具，我們先來認識和閱讀載體圖譜吧。一、載體分類及載體組成元件載體分類1、按屬性分類:病毒載體和非病毒載體病毒載體是一種常見的分子生物學工具，可將遺傳物質帶入細胞，原理是利用病毒具有傳送其基因組進入目的細胞，進行感染的分子機制。可發生于完整活體或是細胞培養中。可應用于基礎研究、基因療法或疫苗。用于基因治療和疫苗的病毒載體應具備以下基本條件:(1)攜帶外源基因并能包裝成病毒顆粒;(2)介導外源基因的轉移和表達;(3)對，人體不...

蛋白表達助手——密碼子優化

mRNA上3個相鄰的堿基決定1個氨基酸。每3個這樣的堿基叫做1個密碼子。密碼子優化是通過基因工程技術，根據宿主的密碼子偏好性調整基因的同義密碼子，達到消除稀有密碼子的目的，并且優化如mRNA二級結構和Motif等相關參數，從而提高翻譯效率。當異源基因在宿主中無法有效表達時，可以考慮進行密碼子優化，調整同義密碼子和相關的調控元件，提高翻譯效率。通過這種方法提高異源基因翻譯效率的報道已經很多。如為了在人胚胎腎細胞（HEK293T）中提高重組豬白細胞介素-7（pIL-7）的表達，崔...

技術服務|納米抗體親和力成熟服務

1993年，比利時布魯塞爾自由大學免疫學家Hamers-Casterman教授以及他的同事們在駱駝（駱駝科，后來研究證實也包括單峰駱駝和羊駝）的血清中發現了一種與傳統抗體結構不同的新型抗體，這種抗體僅僅由兩條重鏈構成，被稱為重鏈抗體(heavy-chainantibody,HCAb)。重鏈抗體的重鏈的可變區稱為VHH(variabledomainofheavychainofheavy-chainantibody)，通過體外重組表達制備的VHH分子質量僅僅為15kDa，是傳統抗...

酶切反應條件的優化

當建立內切酶酶切反應體系時有幾個關鍵因素需要考慮。比如如何在正確的反應體系中，加入適量的DNA、內切酶和緩沖液，就可以獲得最佳酶切效果。根據定義，在50μl體系中，1單位的限制性內切酶可以在60分鐘內*切割1μg的底物DNA。上述酶、DNA與總反應體積的比值可以做為建立反應體系的參考數據。但是，目前大多數科研人員會遵循下表中所列的標準反應條件，使用5－10倍的過量酶切割DNA，這樣有利于克服由于DNA來源不同、質量和純度不同而造成的實驗失敗。“標準”反應體系內切酶從冰箱取出后...

安諾倫代理Frontier Scientific產品——提供優質產品

FrontierScientific,Inc.（簡稱FSI），創立于1975年，總部位于美國猶他州。自創立之初，FSI即開始為藥物研發、生物技術、工業化學、政府和科研機構提供研發和生產所需要的優質產品和服務。FSI尤其擅長研發和制造卟啉、酞菁、高級硼酸（酯）、藥物研發用小分子中間體和SAR的研究，以及從毫克到公斤級別的先導優化，并能夠為客戶提供CRO、FTE或者FFS服務。FrontierScientific,Inc.(FSI)wasfoundedin1975byDr.Bru...

艾柏森無細胞蛋白表達系統——周期短 通量高

服務簡介無細胞表達系統是一種以外源DNA或mRNA為模板，利用細胞抽提物中的細胞合成機器，蛋白折疊因子及其他相關酶系，通過添加氨基酸和T7聚合酶和能量物質來實現蛋白表達的體外系統。其中包括真核無細胞表達系統和原核無細胞表達系統。艾柏森生物優勢1.更快得到數據，僅需1小時即可獲得功能蛋白，而基于細胞的表達系統則需要數天。2.節約時間，表達蛋白可以直接用后續實驗，不需要額外純化。3.更適合蛋白表達，更適用于激酶等毒性蛋白的表達，也可使用經過修飾的tRNA來進行標記，在某特定位點摻...

瓊脂糖凝膠電泳實驗技巧及異常分析

跑電泳是分子生物學實驗的一項基本技術。只要做分子生物學方面的實驗，可能或多或少，或早或晚都要跑跑電泳。跑電泳是分子生物學實驗的一項基本技術。只要做分子生物學方面的實驗，可能或多或少，或早或晚都要跑跑電泳。跑電泳的材料是瓊脂糖，瓊脂糖凝膠電泳實驗常用以DNA切膠回收，DNA分離和用于佐證DNA是否重組、質粒等是否切開。今天我們就來聊聊瓊脂糖凝膠電泳實驗的一些小技巧小細節。1凝膠制作1．1凝膠濃度配制凝膠的濃度據實驗需要而變，一般在0．8％～2．0％之間，如果一次配制凝膠100m...

細胞轉染那些事兒

細胞轉染對初接觸細胞實驗的科研人員而言，是一道難過的坎兒，細胞轉染率低的話，你珍貴的細胞可能就只能扔掉了。一、轉染的途徑大致可分為物理介導、化學介導和生物介導三類：1.物理介導：電穿孔法、顯微注射和基因槍屬于通過物理方法將基因導入細胞的范例。2.化學介導：方法很多，如經典的磷酸鈣共沉淀法、脂質體轉染方法、和多種陽離子物質介導的技術。3.生物介導：方法有較為原始的原生質體轉染，和現在比較多見的各種病毒介導的轉染技術。理想細胞轉染方法，應該具有轉染效率高、細胞毒性小等優點。病毒介...